تولید پروتئین نوترکیب lin28

امروزه فناوری تولید پروتئین های نوترکیب جهت تولید پروتئین های به لحاظ بیولوژیک ارزشمند در مقیاس زیاد و قابل تخلیص به کار می رود. عملکرد پروتئین lin 28، به عنوان یک فاکتور رونویسی نقش مهمی در پرتوانی سلول های بنیادی و زمان بندی تکامل دارد. تولید این پروتئین با هدف کاربرد آن در دانش سلول های بنیادی، هدف این مطالعه قرار گرفت. در این تحقیق در ابتدا ژن پروتئین lin 28 انسانی از سلول های بنیادی جنینی جداسازی شد. در ادامه با استفاده از سیستم همسانه سازی gatewayدر وکتور بیانی pdest 17همسانه سازی شد. جهت ایجاد قابلیت ورود به سلول برای پروتئین نوترکیب حاصل، hiv tat tagبه توالی این ژن اضافه شد. وکتورنوترکیب حاوی ژن مورد نظر وارد باکتری escherichia coli سویه rosetta (de3) گردید و پروتئین نوترکیب در این باکتری بیان و تخلیص شد. این پروتئین با داشتن نشان هیستیدین با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی تخلیص گردید. پروتئین تخلیص شده، تعیین غلظت و به دو صورت محلول و لیوفیلیزه برای استفاده آماده گردید. نتایج نشانگر تولید موفقیت آمیز پروتئین نوترکیب lin 28 انسانی در مقیاس محدود بود. کلمات کلیدی: پروتئین نوترکیب، lin28، ips